從紫外,可見到近紅外波長(zhǎng)范圍內(nèi)的激光器都可以用作拉曼光譜分析的激光發(fā)源,典型的激光器不限于
紫外:244nm 257nm 325nm 364nm
可見:457nm 488nm 514nm 532nm 633nm 660nm
近紅外:785nm 830nm 980nm 1064nm
靈敏度
拉曼散射強(qiáng)度與激光波長(zhǎng)的四次方成正比,因此藍(lán)綠光可見金光的散射強(qiáng)度比近紅外激光要強(qiáng)15倍以上。在衍射極限條件下,激光光斑的直徑可以根據(jù)公式D=1.22/NA計(jì)算得出,其中是激發(fā)激光的波長(zhǎng),NA是所用顯微物鏡的數(shù)值孔徑,例如,采用數(shù)值孔徑為0.9的物鏡,波長(zhǎng)532nm激光的光斑直徑理論上可以到0.72微米,在同樣條件下使用785nm波長(zhǎng)激光時(shí),激光光斑直徑理論上zui小值為1.1μm因此zui終的空間分辨率在一定程度上取決于激發(fā)激光的選擇。可以基于樣品特性特性對(duì)激發(fā)波長(zhǎng)進(jìn)行優(yōu)化,例如:藍(lán)綠光適合無(wú)機(jī)材料以及表面增強(qiáng)拉力試驗(yàn)紅色和近近紅外激光適合于抑制樣品熒光。
紫外激光適合生物分子蛋白質(zhì),DNA RNA等,的共振拉曼試驗(yàn)以及一直樣品熒光。